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注意事項:GenGreen nucleic acid gel stain
1) 關(guān)于核酸染料相關(guān)產(chǎn)品的選擇:
如果您使用紫外成像儀,建議選擇YeaRed(Cat#10202ES76)-EB核酸染料的無(wú)毒替代品,具有同EB相同的光譜特性;如果您 使用激光成像儀或希望在可見(jiàn)光下觀(guān)測,請選擇YeaGreen,在凝膠染色中是SYBR Green I的*替代品,安全無(wú)毒。YeaGreen 雖然具SYBR Green I 相似的光譜特性,且在凝膠染色方面效果優(yōu)于SYBR Green I,但不建議用于qPCR。建議使用專(zhuān)為此用途 設計的SUPER Green I(Cat#10206ES76) 和RTGreen(Cat#10207ES76)。
2) 極少數情況下,質(zhì)粒經(jīng)某些酶切后的DNA樣品會(huì )出現拖尾和分辨率降低的問(wèn)題,此時(shí)建議同時(shí)嘗試兩種染色方法以決定哪種 方法更適合。
3 )為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。
產(chǎn)品優(yōu)勢:GenGreen nucleic acid gel stain
安全無(wú)毒:*的油性和大分子特點(diǎn),使其不能穿透細胞膜進(jìn)入細胞。艾姆斯氏試
驗結果表明,該染料的誘變性遠小于溴化乙錠(EB)。
穩定性*:適用于微波或其他方法加熱,可以在室溫下保存。
高靈敏度,低背景:樣品熒光信號強,背景信號低。
廣泛的適應性:適用于預制凝膠和凝膠電泳后染色,可用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰
胺凝膠電泳; dsDNA、ssDNA或 RNA染色。
對 DNA 和 RNA 的遷移影響極小:對核酸遷移的影響小于 SYBR Green I
染色過(guò)程簡(jiǎn)單:與EB一樣,在預制膠和電泳過(guò)程中不必擔心染料降解;而電泳后
染色過(guò)程也只需30分鐘且無(wú)需脫色或沖洗,即可直接用可見(jiàn)光凝膠透射儀觀(guān)察。
GenGreen與標準凝膠成像系統以及可見(jiàn)光激發(fā)的凝膠觀(guān)察裝置*兼容
GenGreen nucleic acid gel stain 核酸染料GG1301-500UL使用方法:
1.膠染法(用法同EB)
- 配膠時(shí)加入GenGreen 核酸染料。(100ml瓊脂糖膠溶液中加入5-10μLGenGreen染料儲液)
- 按照常規方法進(jìn)行電泳。GenGreen 兼容所有常用的電泳緩沖溶液
- 注: 此方法不適合預制聚丙烯酰胺凝膠,對于聚丙烯酰胺凝膠請使用泡染法。
- 2.泡染法
Ø 按照常規方法進(jìn)行電泳
Ø 用H2O將GenGreen儲液稀釋約3,300倍到0.1M NaCl中,制成3× 染色液。
(例如將15μL GenGreen 儲液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。 - 將凝膠小心地放入合適的容器中,如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的3× 染色液浸沒(méi)凝膠。
- 室溫振蕩染色30min左右。*染色時(shí)間根據凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。
- 注:用泡染法染色時(shí),染料用量較多。單次使用的染色液可重復使用3次左右。
對于含3.5~10%丙烯酰胺的凝膠,染色時(shí)間通常介于30min到1h,并隨丙烯酰胺含量增加而延長(cháng)。
特別提醒:
Ø 如果您使用的是紫外成像儀,請選GenRed和GenGreen均可;如果您使用激光成像儀或希望
在可見(jiàn)光下觀(guān)測,請選擇GenGreen。在膠染色方面,GenGreen是優(yōu)于SYBR GreenI的一種染料。
Ø 本品用DMSO 溶解,因DMSO 的熔點(diǎn)是18.5℃,用前請放置到室溫充分溶解。長(cháng)期儲存建議4℃儲存,
平時(shí)使用室溫避光儲存即可。
為什么有時(shí)候會(huì )出現DNA條帶彎曲或者條帶遷移偏移的情況?
GenGreen核酸染料是為了攻克核酸染料毒性問(wèn)題,而研發(fā)設計的一款油性及大分子物質(zhì),
因為它的這種特性使其不能穿透細胞膜進(jìn)入細胞內,實(shí)現其無(wú)毒性。同時(shí)也因為其結構特性,
對于有些DNA樣品在預制膠中的電泳會(huì )受到遷移影響。 例如:某些質(zhì)粒經(jīng)酶切后的DNA樣品會(huì )
出現拖尾和分辨率降低,DNA條帶遷移受影響的情況。可以通過(guò)以下幾方面排除影響:
1:減少DNA樣品上樣量。DNA樣品濃度控制在50-200ng/lane。
2:減少GenGreen核酸染料的使用量,核酸染料終濃度為0.5×--1×。
3:瓊脂糖凝膠濃度要合適,對于大片段DNA樣品,低瓊脂糖凝膠濃度有利于DNA遷移。
4:更換新的電泳緩沖液。降低電壓,電泳時(shí)電壓4-6V/cm。
5:如果還是看到條帶分離效果不理想,建議使用泡染法染色以確認哪種方法更合適。
配制好的瓊脂糖凝膠是否可以保存使用,可保存多長(cháng)時(shí)間?
GenGreen核酸染料是一種非常穩定的染料,配制好的凝膠,可4℃,密封保存使用。
只要凝膠沒(méi)有損壞,收縮,即可使用。 實(shí)驗驗證可保存3個(gè)月。
藍光儀優(yōu)勢特點(diǎn)
體積小巧,方便移動(dòng);
免維護,LED壽命超長(cháng),免去了經(jīng)常要更換紫外燈管的麻煩;
更安全,與紫外相比可見(jiàn)的藍光要安全很多,首先免去了紫外對人皮膚和眼睛的輻射傷害,
其次也不用擔心長(cháng)時(shí)間照射導致核酸片段斷裂、交聯(lián)、替換等損害;
實(shí)時(shí)跟蹤,觀(guān)測方便,不用擔心條帶遷移出去;如果條帶不理想,可以隨時(shí)終止電泳,以節約實(shí)驗時(shí)間。 -
- 公司介紹:
- 北京鼎國昌盛生物技術(shù)有限責任公司是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售、培訓和咨詢(xún)于一體的高科技生物技術(shù)企業(yè)。多年來(lái),公司在總周衛東的帶領(lǐng)下,以追求品質(zhì),技術(shù)創(chuàng )新,客戶(hù)至上,關(guān)愛(ài)員工為己任,致力于成為杰出的生物實(shí)驗室材料供應商。
公司總部位于北京市昌平區北七家鎮北順工業(yè)園,在上海、廣州、重慶、長(cháng)沙、西安、天津、長(cháng)春、沈陽(yáng)、昆明、武漢、南京、鄭州、新疆、濟南、福州、杭州、石家莊設有17家直屬分公司。現有員工300余人,以博士、碩士為帶頭人,本科生為中堅力量,優(yōu)秀的大專(zhuān)及高中生為輔助力量,形成了龐大的集科研、管理、銷(xiāo)售于一體的高科技人才體系。
公司主要業(yè)務(wù)涉及分子生物學(xué)、生物化學(xué)、免疫學(xué)、細胞生物學(xué)、微生物學(xué)、藥理毒理學(xué)等學(xué)科實(shí)驗室的設計、籌備與建立,儀器、試劑、耗材和實(shí)驗室輔助用品的銷(xiāo)售,生物領(lǐng)域多學(xué)科綜合性實(shí)驗技術(shù)服務(wù)等。除自主研發(fā)生產(chǎn)的產(chǎn)品外,公司還代理多家國內外的產(chǎn)品,包括Greiner、PALL、Fisher、Genview、TGC、ProtEra、ProSpec、KSBIO、DAIHAN WISD、力康、立洋、大龍等。
公司多年來(lái)專(zhuān)注于生物領(lǐng)域的前沿進(jìn)展,與多家科研機構成為長(cháng)期技術(shù)合作伙伴,有承擔國家重大科研項目的經(jīng)濟和技術(shù)實(shí)力,先后承擔的科研項目有:國家重大新藥創(chuàng )制科技重大專(zhuān)項,北京市海淀區科學(xué)技術(shù)委員會(huì )專(zhuān)項,北京市科學(xué)技術(shù)委員會(huì )創(chuàng )新基金項目,上海市科技型中小企業(yè)技術(shù)創(chuàng )新資金項目。公司注重知識產(chǎn)權,在電泳用品、姜黃素類(lèi)藥物、磁珠的生產(chǎn)和利用方面,擁有多項國家和發(fā)明。
公司擁有強大的銷(xiāo)售網(wǎng)絡(luò )和銷(xiāo)售團隊,為用戶(hù)提供*、一站式服務(wù),除了銷(xiāo)售人員面對面直接銷(xiāo)售以外,用戶(hù)可以通過(guò)、傳真、電子郵件、網(wǎng)上訂購、800和400免費等多種渠道訂購產(chǎn)品。公司配有專(zhuān)業(yè)、強大的物流管理和配送體系,實(shí)現了物流智能化管理,銷(xiāo)售人員在全國的任一地方都能實(shí)時(shí)查詢(xún)公司庫存并且實(shí)時(shí)訂貨。專(zhuān)業(yè)的物流配送團隊,精良的實(shí)驗儀器、標準化的實(shí)驗室和*的技術(shù)人員為公司的銷(xiāo)售提供了穩固的。
公司的發(fā)展得到了社會(huì )各界和各級政府部門(mén)肯定,2007年獲國家高新技術(shù)企業(yè),2010年獲中關(guān)村高新技術(shù)企業(yè),2010年獲海淀區創(chuàng )新企業(yè),2010年獲得中關(guān)村誠信企業(yè),2010年通過(guò)ISO9001:2008質(zhì)量體系認證。